魔術表演

　　相差顯微鏡是用於觀察未染色標本的顯微鏡。活細顯微鏡胞和未染色的生物標本，因細胞各部細微結構的折射率和厚度的不同，光波通過時，波長和振幅並不發生變化，僅相位發生變化(振幅

差)，這種振幅差人眼無法觀察。而相差顯微鏡通過改變這種相位差，並利用光的放大鏡衍射和干涉現像，把相差變為振幅差來觀察活細胞和未染色的標本。

　　相差顯微望遠鏡鏡使用中的幾個問題：

　　1)相位倒轉 當n’n時得到像的明暗反差正好相反，稱為相位倒轉。當 相位差δ=0時是無法識別的，隨著δ的增大反差變大，當δ繼續增大到某一值後會出現相位倒轉。用90%高吸光值(高反

天文望遠鏡差) 物鏡時，這個轉變值約為0。55λ，用70%標准吸光值的物鏡時約為0。33λ。較高吸光值的物鏡應該用於分辨較小的 光程差。

　　2)暈輪和漸暗效應 在相差顯微鏡成像過程中，某一結構由於相位的延遲而變暗時，並不是光的損失，而是光在像平面上重新分配的結果。因此在黑暗區域明顯消失的光會在較暗物體的

周圍出現一個明亮的 暈輪。這是相差顯微鏡的缺點，它妨礙了精細結構的觀察，當環狀光闌很窄時 暈輪現像更為嚴重。相差顯微鏡的另一個現像是漸暗效應，指相差觀察相位延遲相同的較

大區域時，該區域邊緣會出現反差下降。

　　3)樣品厚度的影響 當進行相差觀察時，樣品的厚度應該為5μm或者更薄，當采用較厚的樣品時，樣品的上層是很清楚的，深層金相顯微鏡則會模糊不清並且會產生相位移干擾及 光的散射干擾。

　　4)蓋玻片和載玻片的影響 樣品一定要蓋上蓋上蓋玻片，否則環狀光闌的亮環和相板的暗環很難重合。相差觀察對 載玻片和蓋玻片的玻璃質量也有較高的要求，當有劃痕，厚薄不均或凹

凸不平時會產生亮環歪斜及相位干擾。另外玻片過厚或過薄時會使環狀光闌亮環變大或變小。